商品介紹:
測(cè)定意義
S-NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
測(cè)定原理:
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯,后者在400nm有最大吸收峰,通過測(cè)定吸光值升高速率來計(jì)算NAG活性。
自備用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
SNAG土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶可見分光光度法 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | FS-01S63740 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時(shí)加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時(shí)加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
NADH 標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
3、細(xì)胞或細(xì)菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
NADH 的提取:收集 500 萬細(xì)胞或細(xì)菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強(qiáng)度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應(yīng)過程要注意避光。
3、當(dāng)吸光值大于 1 時(shí),建議稀釋后測(cè)量,計(jì)算公式中應(yīng)當(dāng)乘以稀釋倍數(shù)。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Aurora B/STK-1 有絲分裂激B抗體 * 0.1ml
phospho-PTPRA(Tyr798) 磷化酪磷α抗體 * 0.1ml
phospho-PTPRA(Ser180) 磷化酪磷α抗體 * 0.1ml
Aurora C 有絲分裂激B抗體 * 0.2ml
Aurora A/B/C 有絲分裂激A/B/C抗體 * 0.2ml
LEO1 RNA聚合相關(guān)蛋白LEO1抗體 * 0.1ml
B7-H1/PD-L1/CD274 程序性死亡配體1抗體 * 0.1ml
B7-DC/CD273/PDL2 程序性死亡配體2抗體 * 0.1ml
ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 * 0.1ml
phospho-LEO1(Ser551) 磷化RNA聚合相關(guān)蛋白LEO1抗體 * 0.1ml
ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 * 0.1ml
CT054/C20orf54 核黃轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 * 0.2ml
ZDHHC21 γ-基A受體相關(guān)膜蛋白3 * 0.2ml
ASGPR1/ASGR1 唾液糖蛋白受體1抗體 * 0.1ml
ITPR1 5-三磷肌受體1抗體 * 0.2ml
SNAG土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶可見分光光度法辛二 99%4,4'-二氯二甲酮 99%BNP(rat) 大鼠腦鈉/腦鈉尿肽
氫氧化鈷 98%4,4'-二羥基二甲酮 98%Rat visfatin 大鼠內(nèi)臟脂肪
草鎳 99.999%4,4'-二氟二甲酮 99%ILK-1(Rat) 大鼠整合連接激1
氧化鎳 AR,99.0 %氧乙 98%Humen IFN- Alpha 大鼠α-干擾
4-基甲脒 97%納米鋇鐵氧體 30-50nm 球形 99.5%IFN- Gamma 大鼠γ-干擾
(2-基)肼 95%納米鋇鐵氧體 200nm,99%Collagen I 大鼠I型膠原
香蘭鹽鹽 99%氧化鈰 20nm 球形,99.5%PINP 大鼠I型前膠原肽
對(duì)氯甲 AR,98.0%三氧化二鉻 60nm 球形,98.0%Collagen III 大鼠III型膠原