丙酮酸羧化酶試劑盒說明書樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (丙酮酸羧化酶試劑盒說明書過過濾)。
4 ). 丙酮酸羧化酶試劑盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
產品名稱:?丙酮酸羧化酶試劑盒說明書
規格:100管/96樣
測試方法:微量法
測定意義:丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)廣泛存在于動物、霉菌和酵母的線粒體中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,是糖異生過程的*個限速酶,在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。
丙酮酸羧化酶試劑盒說明書樣品測定的準備:
1、細胞、細菌或組織樣品的制備 :
細菌或細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,棄上清;按照每100萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
3、標準品的處理:稱取1mg,將標準品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
丙酮酸羧化酶試劑盒說明書測定步驟:
1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至520nm,蒸餾水調零。
2、取0.5mL上清液(或稀釋后的標準品)+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二于有蓋試管中,置沸水浴中保溫30min(蓋緊,防止水分散失),每10min振蕩一次。
3、待冷卻后,在試管中加入1mL試劑三,振蕩30s,靜置片刻,使色素轉至試劑三;吸取0.8mL-1mL上層溶液于1mL玻璃比色皿中,用試劑三調零,于520nm波長處比色,記錄吸光值。
4、根據標準品吸光值和濃度,建立標準曲線。
2--5-甲基噻吩 分類: 化學,固相合成,
4-戊基* 分類: 化學,合成試劑,
2,6-二羥乙氨基甲苯 分類: 化學,合成試劑,
環丁烷甲酸乙酯 分類: 化學,合成試劑,
4-甲烷磺酰苯硼酸 分類: 化學,合成試劑,
4-氯-4-氧代丁酸甲酯 分類: 化學,合成試劑,
AMP鈉鹽 分類: 化學,合成試劑,
beta-紫羅蘭酮 分類: 化學,合成試劑,
1,2,3-三氟苯 分類: 化學,合成試劑,
N-乙基-N-苯胺 分類: 化學,合成試劑,
5-氯-2-甲基苯硼酸 分類: 化學,合成試劑,
N-Boc-3-哌啶甲酸甲酯 分類: 化學,合成試劑,
N-乙基-N-基間甲苯胺 分類: 化學,合成試劑,
丁酸葉醇酯 分類: 化學,固相合成,
2,6-二氯-3-吡啶 分類: 化學,合成試劑,
二叔丁基疊氮草酸 分類: 化學,固相合成,
2-哌啶乙醇 分類: 化學,合成試劑,
3-芐氧基苯胺 分類: 化學,合成試劑,
1-(2-苯并呋喃基)乙酮 分類: 化學,固相合成,
環吡酮雜質B 分類: 化學,合成試劑,
1-芘硼酸 分類: 化學,固相合成,
*三萜酸 A 分類: 標準品,中藥標準品,
Trilobatin 2''-acetate 分類: 標準品,中藥標準品,
Trichokaurin 分類: 標準品,中藥標準品,
Tetrahydrolachnophyllum lactone 分類: 標準品,中藥標準品,
Tetrachyrin 分類: 標準品,中藥標準品,
繡線菊堿 F 分類: 標準品,中藥標準品,
Spegatrine 分類: 標準品,中藥標準品,
Sequosempervirin B 分類: 標準品,中藥標準品,
Sanggenol A 分類: 標準品,中藥標準品,
Prionitin 分類: 標準品,中藥標準品,
Palbinone 分類: 標準品,中藥標準品,
Paeonilactone B 分類: 標準品,中藥標準品,
Olivil monoacetate 分類: 標準品,中藥標準品,
米仔蘭酸堿 分類: 標準品,中藥標準品,
米仔蘭堿 分類: 標準品,中藥標準品,
Norscopolamine 分類: 標準品,中藥標準品,
?丙酮酸羧化酶試劑盒說明書苦瓜皂苷 G 分類: 標準品,中藥標準品,
Marmin 分類: 標準品,中藥標準品,
Maoyerabdosin 分類: 標準品,中藥標準品,
Magnolignan A 分類: 標準品,中藥標準品,
Macusine B 分類: 標準品,中藥標準品,
大果桉醛 A 分類: 標準品,中藥標準品,
丙酮酸羧化酶試劑盒說明書ELISA實驗丙酮酸羧化酶試劑盒說明書用規則
1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。